同重同位素標記的相對和 jué對定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技術由 AB SCIEX 于 2004 年研發推出的一種多肽體外標記技術。
iTRAQ 標記試劑共有 8 種標記,每種標記都包含報告基團、質量平衡基團和多肽反應基團,它們的分子量之和相等,因此不同標記的樣本中的同一肽段表現為相同的質荷比。在經過二級質譜時,質量平衡基團丟失,而報告基團在二級質譜低質量區產生不同的報告離子,根據報告離子的信號強度值可獲得樣品間相同肽段的定量信息。目前 iTRAQ 可同時比較多達 8 組樣品的蛋白質表達差異。而由 Thermo Fisher 推出的同款原理相同的產品 TMT(Tandem Mass Tag)可同時標記分析 10 個樣品。
iTRAQ 標記試劑結構
1、靈敏度高:可以檢測出低豐度蛋白;
2、通量高:同時對 8 個(TMT10 個)樣本進行分析;
3、結果可靠:通過一批次上機,定性定量結果更加可靠;
4、自動化程度高:液相與質譜連用,自動化操作,分析快,分離好。
1、細胞:5×106 個細胞;
2、動物組織:200mg;
3、植物組織:800mg;
4、微生物:400mg;
5、血清血漿:300ul。
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